【應用實例】SparkFlux 2000電霧式檢測器(CAD):破解天然產物制備檢測難題,制備色譜“黃金搭檔”46
發表時間:2025-06-24 14:48 長期以來,無/弱紫外吸收成分的檢測是天然產物制備的技術瓶頸。諸如人參多糖、靈芝酸、天麻素等完全無紫外吸收的成分,由于缺乏生色團,紫外檢測器難以對其進行有效捕捉。對于弱紫外吸收成分,例如人參中的三萜皂苷類,由于其結構僅含一個雙鍵,導致紫外吸收能力較弱,檢測時需對流動相背景吸收提出高要求,通常僅可選用昂貴的色譜乙腈作為流動相,并配合低波長進行檢測,而無法采用更為廉價的甲醇,這無疑增加了分離制備的成本,進而限制了相關研究與應用的發展。蒸發光檢測器(ELSD)雖能在一定程度上解決無紫外吸收成分的檢測問題,但也存在若干問題,最為主要的是重復性較差,以及 S 形響應曲線(低濃度響應差,高濃度響應過強)的缺陷。
電霧式檢測器作為一種氣溶膠檢測器,在靈敏度和檢測范圍方面表現出色,有效克服了蒸發光檢測器的諸多不足。然而,進口電霧式檢測器價格昂貴,多用于與分析液相色譜聯用,鮮有與制備色譜聯用的案例。在這一背景下,SparkFlux 2000電霧式檢測器(CAD)作為完全國產化的設備,具有極高的性價比,有望填補了這一空缺。該檢測器已成功應用于多種無紫外或弱紫外吸收活性天然產物的分析檢測(詳見此前發布的推文)。這些應用實例證明了該檢測器在提高檢測靈敏度、擴大檢測范圍以及優化分析方法方面的顯著優勢,使其成為天然產物制備檢測領域極具潛力的“黃金搭檔”。為了驗證SparkFlux 2000-CAD與制備色譜聯用的效果,我們通過分流將部分制備洗脫液引入SparkFlux 2000-CAD,對三七皂苷進行的制備分離檢測測試。 二、 儀器與實驗2.1 儀器如圖1所示,該系統采用島津8A制備色譜,并配備了10A紫外檢測器和SparkFlux 2000-CAD。紫外檢測器串聯接入流路,利用三通接頭和分流管,在主流路上分流出0.5mL/min的流量,進而引入CAD,完成檢測過程。
圖1 配備紫外檢測器和CAD的制備色譜系統 2.2 樣品配置方法總皂苷含量為80%的三七皂苷提取物,以純水為溶劑配成10 mg/mL的溶液,過膜后置于4℃冰箱備用。 2.3 分析條件進樣體積:5 mL 流動相:甲醇/水,流速:30 mL/min 紫外檢測波長:203 nm CAD檢測條件:電壓 3 kV,蒸發溫度(35 oC),增益1。 三、 結果與討論 圖2的結果展示了三七皂苷提取物在反相制備色譜上分別通過紫外檢測器和SparkFlux 2000-CAD獲得的色譜譜圖。結果顯示,在紫外檢測器上僅能觀測到約10個色譜峰,這是因為流動相中甲醇的背景吸收過強,致使大部分低含量成分的色譜峰被掩蓋。 與之相比,通過SparkFlux 2000-CAD檢測獲得的色譜圖上,色譜峰數量遠超紫外檢測器,且部分譜峰因信號強度超出量程范圍而出現平臺。這表明,采用SparkFlux 2000-CAD能夠實現皂苷類成分在甲醇-水流動相體系中的高靈敏檢測。 然而,過高的響應值對制備流程并非全然有利,它可能會使信號超出量程范圍,從而形成平臺峰。針對這一問題,我們可以通過調整SparkFlux 2000-CAD增益參數,有效降低峰高,從而改善上述問題。
圖2 紫外檢測器vs CAD檢測三七皂苷的制備色譜圖 綜上結果顯示,借助 SparkFlux 2000-CAD 與制備色譜聯用技術,有望分離制備出更多具有潛在活性的成分。在后續研究中,可進一步結合質譜聯用等其他分析手段,對分離制備得到的成分開展更精準的定性定量分析以及活性研究,從而推動天然產物在醫藥、保健品等領域的開發與應用。 四、 聯系方式通過以下渠道了解更多關于SparkFlux2000電霧式檢測器(CAD)的信息: 網址:m.aiwedding.cn 郵箱:sales@lingfenginst.com 電話:18975894050
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